فصل وتنقية الفلافونويدات :
يتم فصل وتنقية الفلافونويدات باستخدام طرق الفصل
الكروماتوجرافي بأنواعه المختلفة . ولعل أكثر هذه الطرق شيوعا
في الاستخدام لفصل هذه المركبات هي كروماتوجرافي الطبقة
الرقيقة و كروماتوجرافي العمود "تم التعريف عنها وشرحها في أول البحث"
إذ تستخدم الأولى لفصل الكميات الصغيرة في حين تستخدم الطريقة
الأخيرة عندما تتوافر كميات أكبر من المركب الطبيعي , وتستخدم
أيضا طريقة كروماتوجرافي الورق حيث أنه عند تطبيق هذه
الطريقة فإنه تستخدم المذيبات الكحولية لتحريك بقع هذه المركبات
على الورق . ومن الكحولات المستخدمة الميثانول والإيثانول
والبيوتانول . هذا ويتبع في تحريك هذه البقع الجافة على الورق
للمرة الثانية (بعد استخدام المحاليل الكحولية) يتبع استخدام 15%
حمض الخل كما هو شائع في تحريك معظم الفلافونويدات على
الورق . وفي حالة تنقية الأنثوسيانينات بواسطة كروماتوجرافي
الورق فإنه يستخدم خليط من البيوتانول وحمض HCl في تحريك
بقع هذه المركبات للمرة الأولى بينما يستخدم لتحريكها في المرة
الثانية محلول 1% حمض HCl . ومما تحسن الإشارة إليه هنا أن
طريقة كروماتوجرافي الورق تعطي دلالة جيدة على نوع المركب
الفلافونويدي , وذلك أذا ما عرضت بقع هذه المركبات التي على
الورق لأشعة UV في وجود أوعدم وجود النشادر . حيث تظهر
ألوانا مختلفة في الحالتين للأنواع المختلفة من الفلافونويدات .
وعموما فإن الفلافونات وكذلك الجليكوزيدات (للفلافونولات) تعطي
ألوانا بنفسجية إذا ما عرضت لضوء UV بعد إضافة النشادر.
يستخدم كروماتوجرافي العمود لفصل الكميات الكبيرة من
الفلافونويدات . يعبأ العمود بالصنف الثابت الذي قد يكون سليكاجل
أو سليلوز أو بولي أميد حيث أن السليكاجل تستخدم لفصل
الفلافونويدات الأقل قطبية , في حين أثبت السليلوز فعاليته في فصل
الفلافونويدات الجليكوزيدية عن تلك المجردة من السكر , هذا وقد
لقي البولي أميد تطبيقا واسع النطاق في حقل الفلافونويدات نظرا
لكون هذه المادة مناسبة لفصل جميع المركبات الفلافونويدية وعلى
الأخص لفصل الفلافونويدات الجليكوزيدية بعضها عن بعض .
ونقطة الاختلاف في استعمال هذه المادة , مقارنة بالسليلوز
والسليكاجل , هي أنها تغسل في العمود بالماء و الميثانول قبل
تطبيق خليط الفلافونويدات المراد فصله , وذلك لتجنب الشوائب
التي تذوب في المذيبات المستخدمة للتملص Elution .
هذا وتحسن الإشارة إلى أن هناك صنف آخر هو سيفادكس , يتخدم
لفص الفلافونويدات على الدوام أو على الأقل بقدر استخدام البولي
أميد لهذا الغرض . وكالمتبع بعد تعبئة العمود يذاب خليط
الفلافونويدات في أقل كمية ممكنة من المذيب المناسب ويطبق في
العمود , ومن ثم تستخدم المذيبات المناسبة لعملية التملص .
يتبع ..
أخوكم حمض الحشيشيك ..
عرض المشاركات
كل االشكر والتقدير للـ المجد الأصيل على المرور والتعليق 
