أرسل بواسطة: Taq polymerase في أكتوبر 31, 2005, 05:57:05 مساءاً
يعرف تفاعل Polymerase Chain Reaction أختصاراً بال PCRوهو يمثل طريقة حديثة نسبياً لمضاعفة الجين تعتمد على استعمال كمية ضئيلة من DNA الكلي المعزول من الكائن المحتوي على الجين المرغوب ليتم منه مضاعفة الجين المرغوب دون باقي الجينات الأخرى الموجودة معه وذلك داخل اجهزة خاصة تعرف بال PCR machine أو Thermocyclers لما يتضمنه برنامج استعمالها من دورات حرارية متتالية مختلفة وتصلح طريقة الPCR هذه مع الجينات صغيرة الحجم والمعروف تتابع Nucleotide بها او بمناطق قصيرة على جانبيها وتعتمد هذه الطريقة في تحضير الجينات على استعمال مخلوط تفاعل مكون من DNA المحتوي على الجين المرغوب وزوج من اشرطة قصيرة مفردة من DNA معروف تتابعها وتعرف بالبوادئ مع مخلوط من Nucleotide الأربعة الخاصة بDNA وأحد انزيماتDNA-Polymerases مثل الإنزيم المعروف بالTaq DNA-Polymerase المستخلص من البكتيريا المحبة للحرارة والتي عزلت من الينابع الحارة بحديقة الصخرة الصفراء yellow stone park بكاليفورنيا ولإجراء التفاعل يتم رفع درجة الحرارة الى 30-65 سليزيه لمدة 30ث للسماح لزوج البرايمر او البوادئ Primer بالازدواج مع شريطي DNA الخاصين بالجين المرغوب حيث يزدوج البرايمر الاول على يمين الجين مع تتابع آخر مكمل له على الشريط الآخر وهنا يتم رفع درجة الحرارة إلى 65-75 سليزيه لمدة 2-5ق فيقوم الانزيم بإطاله البرايمر وذلك بإضافة وحدات من Nucleotide الخاصة DNA والمكمله لشريطي DNA المكونين للجين المرغوب وبتكرار هذه الدورة من البرنامج الحراري وفي ظل توفر مكونات مخلوط التفاعل تتراكم نسخ الجين المرغوب ليصل عددها إلى أكثر من بليون نسخة وذلك بعد 32 دورة مما يسمح بفصل الجين بالهجرة الكهربائيه والحصول عليه في صورة نقيه
تحياتي
Fantasy
أرسل بواسطة: الأحيائي الصغير في أكتوبر 31, 2005, 06:34:39 مساءاً
في المنتديات العلمية
و جزاك الله كل خير
أرسل بواسطة: أبو سلطان في أكتوبر 31, 2005, 07:26:52 مساءاً
أهلا بك أخي Taq polyemerase في منتدى الأحياء
شكرا لك على الموضوع القيم ... والجديد .
صورة ل Thermocyclers :
صورة لجهاز الهجرة الكهربائية electrophoresis الذي يتم من خلالة استخلاص الجينات المضاعفة بصورة نقية
نتيجة المسح الكلي للعينات scan لتحديد ال band الي يحتوي على الجين المطلوب
تحياتي .....