>>>>>>>
مراحل تقنيات البصمة الوراثيةمرت تقنيات البصمة الوراثية بالعديد من المراحل وكانت كل مرحلة تمثل انجازا في المراحل التطورية لهذه التقنيات .
اولا: تقنية الحزم الوراثية : Restriction Fragments Length Polymorphism تسمى هذه التقنية بتقنية (RFLP) واول من استخدم هذه الطريقة هو العالم البريطاني "أليك جفري" وتعتمد هذه الطريقة على عزل واستخلاص الحامض النووي من الخلية وتنقيته ثم معاملته بخليط من انزيمات القطع البكتيرية حيث يؤدي ذلك الى تقطيعه الى حزم دناويه DNA Bands ، ثم يتم التفريد الكهربي للحزم الدناوية DNA Electrophoresis ، ثم بعد ذلك تنقل باندات الدنا على غشاء من النيتروسليلوز في عملية تسمى بــ DNA Blotting ، ثم يضاف منقب عبارة عن تتابع من النيوكليوتيدات محددة في شكل سلسلة مفردة يمكنها ان ترتبط بالتتابع المكمل لها على الغشاء ، ويظهر التكامل بالتصوير بواسطة الاشعة السينية (X-Ray) في شكل بقع سوداء حيث يتم بعد ذلك تحليل النتائج بواسطة قاعدة بيانات حاسوبية.
تعتمد هجرة الحزم الدناوية على الجل في التفريد الكهربي على الوزن الجزيئي لهذه الحزم فالحزم كبيرة الوزن الجزيئي تظهر في التفريد الكهربي في المستوى الاعلى من الجل اما الحزم متوسطة الوزن الجزيئي تظهر في المستوى المتوسط من الجل اما الحزم الصغيرة الوزن الجزيئي تظهر في المستوى الاسفل من الجل.
,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
في تقنية نقل الحزم على غشاء من النيتروسليلوز فان المنقب Probe المضاف الى الحزم بعد نقل الحزم الى الغشاء من النوع المرقم اشعاعيا ويسمى "Labeled Probe" ، ويتم الكشف عنه بواسطة تعريض الفيلم للاشعة السينية ، يحتاج ذلك الى مراعاة احتياطات الامان ، حيث يكون للتعامل مع الجزيئات البيولوجية المرقمة احتياطات امان ، ويكون للتعامل مع الجزيئات البيولوجية المرقمة اشعاعيا خطورة على النظام البيولوجي .
ان عملية التعارف وتحديد الجاني في تقنيات ال(RFLP) تعتمد على محورين مهمين :
الاول : حدوث تزاوج او تكامل بين حزم الدنا من العينة البيولوجية (المأخوذة من مسرح الجريمة) وحزم المنقب المضاف .
الثاني : مكان حدوث التزاوج على الجل .
ان حدوث التزاوج يؤكد تكامل التسلسلات الدناوية DNA sequences بين عينتي الحامض النووي ، اما ظهور الحزم المتكاملة لكل من :
1. حزمة الدنا DNA من خلايا العينة المنقولة من مسرح الجريمة مع حزمة الدنا من المنقب .
2. حزمة الدنا من خلايا المتهم مع حزمة الدنا المنقب .
في موضوعين متساويين في الوزن الجزيئي في المستوى الافقي ، فهذا يؤكد حجية ان العينة البيولوجية الموجودة في مسرح الجريمة والتي عزل منها الحامض النووي DNA هي من المتهم .
قد تكون العينة البيولوجية خلايا دم او خلايا شعر او خلايا من انسجة مكشوطة او خلايا عالقة في افرازات ما او ملتصقة على بقايا السجائر الملقاة في مسرح الجريمة لذا يتم في هذه الحالة عزل الحامض النووي من جميع العينات البيولوجية التي عثر عليها في مسرح الجريمة وكذلك عزل الحامض النووي من جميع عينات دم من المتهمين ثم المعاملة بانزيمات القطع والنقل على غشاء نيتروسليلوز او غشاء نايلون ، وعمل تهجين بين حزم الدنا من عينات مسرح الجريمة وعينات المتهمين وعينة الضحية ، ثم يتم التفريد الكهربي والتصوير بالاشعة السينية وملاحظة حدوث التزاوج (Matching) بين حزم الدنا من المصادر السابقة .
>>>>>>>>>