Advanced Search

المحرر موضوع: اول طلب في هذا المنتدى....  (زيارة 1123 مرات)

0 الأعضاء و 1 ضيف يشاهدون هذا الموضوع.

يونيو 10, 2007, 07:18:58 صباحاً
زيارة 1123 مرات

المشولي

  • عضو متقدم

  • ****

  • 557
    مشاركة

  • عضو مجلس الأحياء

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« في: يونيو 10, 2007, 07:18:58 صباحاً »
الاخوة الكرام في هذا المنتدى الغالي
السلام عليكم ورحمة الله وبركاته
الحقيقة انني اطمع في الحصول على معلومات حول  
PCR و Western BLOT
وهذا اول طلب في هذا المنتدى ارجو ان لا تبخلوا ولوبمعلومة واحدة
 اولا:
1 _ ماهو  ال PCR
2 _ مالغرض منه
3 _ ماهي المواد والمحاليل المستخدمة
4 _ مثال توضيحي بسيط لخطوات عمل مع بكتريا اونسيج جسمي

ثانيا :
كل ما تعرفه عن
Western BLOT


شاكرا لكم سلفا وجعل ما تقومون به في ميزان حسناتكم



في حفظ الله
اللهم انك سلطت علينا عدوا عليما بعيوبنا
يرانا هو وقبيله من حيــــــث لانـــــراه
اللهم آيسه منا كما آيستـه من رحمتك
وقنطه منا كما قنطـته من عـفــــوك
وباعــد بيننا وبينه كما باعـدت
بينه وبين رحمتك وجنتك

                                                                 

يونيو 10, 2007, 02:32:54 مساءاً
رد #1

دانة العراقية

  • عضو خبير

  • *****

  • 1992
    مشاركة

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« رد #1 في: يونيو 10, 2007, 02:32:54 مساءاً »
اهلا وسهلا

الطرق المخبرية السليمة لتشخيص والكشف عن فيروس HIV وتسلسلها
1/ فحص ELISA ( ايلايزا) : وهو فحص يعتمد على الكشف عن الاجسام المضاده التي يكونها الجسم ضد الفيروس وهو فحص مبدئي فقط حيث يلزم تاكيد النتائج الايجابية منه بواسطة فحص اخر (الفحص رقم 2) , وتكمن المشكلة في هذا الفحص في ان المصاب بالفيروس قد يقوم بعمل هذا الفحص قبل مرحلة تكون الاجسام المضاده للفيروس في جسمه وهي ما تسمى بـ (Window Period) او (الفترة الشباكية) وفي هذه المرحلة تكون نتيجة هذا الفحص سلبية وهنا تكمن الخطورة حيث ان الشخص المتبرع بالدم قد ينقل الفيروس الى المريض لان فحوصاته المخبرية اكدت خلوه من الفيروس في هذه الفتره بينما في الحقيقة هو مصاب ويحمل الفيروس ولكن الجسم لم يكون الاجسام المضاده للفيروس
2/ فحص Western Blot (ويسترن بلوت) : وهو فحص يعتمد على ايجاد اجزاء مختلفة من جسم الفيروس وهو فحص حساس ذو تقنية عالية
3/ فحص PCR : وهو الفحص التأكيدي والذي يجزم بعده بوجود الفيروس ويعتمد على ايجاد اجزاء عديده (Antigens) من جسم الفيروس وحددت منظمة الصحة العالمية عدة اجزاء وفق منظومة معينة ليقال بعدها عن المريض انه حامل للفيروس
يجدر الاشارة الى انه يجب عمل الفحوصات مرتين لكل نوع للتاكد كما يجب اخذ عينات مختلفة من المريض لعمل تلك الفحوصات اكثر من مره وفي اكثر من وقت للمزيد من التاكد ولا يجزم بان المريض حامل للفيروس الى وفق بروتوكول معين يعتمد على ايجابية الفحوصات المعينة اعلاه لاكثر من مره .
......


سابحث اكثر واخي لا تشيل هم سواء او طلب او الطلب الميه ما يهمك الكل هنا يتنمنون المساعده   اطلب متى ما شئت

  تحياتي
ادرس القانون لاعرف الخيوط التي تحاك منها اكفان الحق والعدل  ':200:'

يونيو 10, 2007, 04:02:13 مساءاً
رد #2

المشولي

  • عضو متقدم

  • ****

  • 557
    مشاركة

  • عضو مجلس الأحياء

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« رد #2 في: يونيو 10, 2007, 04:02:13 مساءاً »
الاخت دانة العراقية
سلام الله عليك
اشكر لك جميل ما صنعتي شكرا فاق حدوده

سؤالي / ماهي هذه التقنية
اقصد هل هي مستحضرات كيميائية تضاف على البكتريا او النسيج المراد فحصه ثم الفحص المجهري العادي  ام اجهزة متطورة تقوم بنفسها بالفحص وعرض النتائج
بعد إضافة المحاليل المطلوبة



في انتظار الاخوة ابطال المنتدى الغالي
امثال الاخت الغالية دانة


في حفظ الله
اللهم انك سلطت علينا عدوا عليما بعيوبنا
يرانا هو وقبيله من حيــــــث لانـــــراه
اللهم آيسه منا كما آيستـه من رحمتك
وقنطه منا كما قنطـته من عـفــــوك
وباعــد بيننا وبينه كما باعـدت
بينه وبين رحمتك وجنتك

                                                                 

يونيو 10, 2007, 06:13:26 مساءاً
رد #3

سالمونيلا

  • عضو مشارك

  • ***

  • 458
    مشاركة

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« رد #3 في: يونيو 10, 2007, 06:13:26 مساءاً »
وعليكم السلام ورحمة الله وبركاته

 PCR = Polmerase Chain Reaction
مضاعفة الجينات عن طريق إنزيمات البلمرة:

يستخدم لذلك جهاز الدورات الحرارية ( Thermal Cycler ) الذي يعتمد نظام تشغيله على تكرار الدورات الحرارية لمضاعفة الحمض النووي تحت البحث


تتطلب هذه العملية تواجد كل من :
# جهاز الدورات الحرارية ( Thermal Cycler)
# اشخاص مدربين جيدا على استخدام الجهاز، وملمين بطبيعة العملية المطلوبة
# الحمض النووي ( DNA ) من للسلالة تحت البحث في صورة نقية
# بادئات ( Primers  ) مناسبة ( يبلغ طول كل منها حوالي 20 قاعدة نتروجينية، أحدهما مكمل لشريط من الحمض النووي تحت البحث، والآخر مكمل للشريط الثاني
# قواعد نتروجينية ( Nucleotides  )، وأنزيم البلمرة ( DNA Polymerase )
# عينات ضابطة ( ve  &  +ve  amplification controls - )

تتلخص خطوات هذه العملية في النقاط التالية :
1- الدورة الحرارية.

تنقسم كل دورة حرارية إلى ثلاث مراحل :

# فصل الشريط المزدوج للحمض النووي ( Denateration )
تتم هذه المرحلة بتعريض الحمض النووي لدرجة حرارة مرتفعة ( 90- 94 مْ ) لعدة دقائق للحصول على شريطين منفصلين .

# ارتباط البادئات بالشرائط  المفردة ( Annealing )
في هذه الخطوة يسمح للبادئات بالإرتباط بالشرائط المفردة ( كل حسب الشريط المكمل له ) وذلك بخفض درجة الحرارة إلى 50_ 60 مْ ، والإحتفاظ بهذه الدرجة لمدة تتراوح بين 30- 60 ثانية

# امتداد البادئات لتكوين الشرائط المكملة ( E xtension)
تتم هذه الخطوة على درجة حرارة 72 مْ ، حيث تضاف القواعد النتروجينية  بواسطة إنزيم البلمرة إلى البادئات مكونة شرائط مكملة للشرائط الأصلية للحمض النووي المراد مضاعفته.


2- إعادة الدورة الحرارية عدة مرات ( من 30 إلى 50 دورة )

3- تحليل الحمض النووي المتضاعف بالهجرة الكهربية ( Gel Electrophoresis   )

4- تصوير النتائج


وجدير بالذكر ان هذه التقنية يمكن أن تجرى بمقدار قليل جدا من الحمض النووي، ولذلك فهي عادة ماتستخدم مع الأنواع الميكروبية بطيئة النمو (  Mycobacterium tuberculosis  ) او الميكروبات التي يصعب تنميتها،
او مع الفيروسات، بالإضافة إلى الأنواع الأخرى من الميكروبات الخاصة بالدراسات الطبية ، أو الوراثية او التصنيفية .


وماذكرته هو كل مادرسته نظريا ، حيث لم نطبق ذلك عمليا والله الموفق


ســــــــــــــــالمونيلا








العلم قفل ومفتاحه المسألة

يونيو 10, 2007, 08:00:05 مساءاً
رد #4

المشولي

  • عضو متقدم

  • ****

  • 557
    مشاركة

  • عضو مجلس الأحياء

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« رد #4 في: يونيو 10, 2007, 08:00:05 مساءاً »
الاخت  ســــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــالمونيلا
السلام عليكم ورحمة الله وبركاته

وكم نحن محظوظين بمثلك اختي الغالية ..........وحقا علينا ان نقدر امثالك


في حفظ الله
اللهم انك سلطت علينا عدوا عليما بعيوبنا
يرانا هو وقبيله من حيــــــث لانـــــراه
اللهم آيسه منا كما آيستـه من رحمتك
وقنطه منا كما قنطـته من عـفــــوك
وباعــد بيننا وبينه كما باعـدت
بينه وبين رحمتك وجنتك

                                                                 

يونيو 10, 2007, 08:12:03 مساءاً
رد #5

المشولي

  • عضو متقدم

  • ****

  • 557
    مشاركة

  • عضو مجلس الأحياء

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« رد #5 في: يونيو 10, 2007, 08:12:03 مساءاً »
وهذا الرد متفرد بدعوات صادقة من قلب يرقص سرورا
اللهم انك تعلم ان دعواتي ارسلها لمن تعلم انني اقصدها  
إنك تعلم مافي الصدور وأخفى

انـــــــــــــــــــــــــــار الله دربك وأصلح قلبك ومتعك بسمعك وبصرك وقوة بدنك
 ابـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــدآ ما ابقاك. واسعدك في الدنيا والاخرة... وختم لكي بخير




في حفظ الله
اللهم انك سلطت علينا عدوا عليما بعيوبنا
يرانا هو وقبيله من حيــــــث لانـــــراه
اللهم آيسه منا كما آيستـه من رحمتك
وقنطه منا كما قنطـته من عـفــــوك
وباعــد بيننا وبينه كما باعـدت
بينه وبين رحمتك وجنتك

                                                                 

يونيو 13, 2007, 12:43:10 صباحاً
رد #6

سالمونيلا

  • عضو مشارك

  • ***

  • 458
    مشاركة

    • مشاهدة الملف الشخصي
اول طلب في هذا المنتدى....
« رد #6 في: يونيو 13, 2007, 12:43:10 صباحاً »
وإياك ولجميع المسلمين





العلم قفل ومفتاحه المسألة