طلب: صبغة كرام

[ابو حذيفة]

السلام عليكم ورحمة الله وبركاتة
ارجو من الاخوة مساعدتي
باعطائي معلومات وافية عن صبغة كرام الموجبة والسالبة
ولكم جزيل الشكر

[بنت الرافدين]

اهلا وسهلا ابو حذيفة  

صبغة الجرام
تعتبر صبغة جرام (بالإنجليزية: Gram stain) من أهم أنواع الصبغات المستخدمة في المستشفيات للتعرف على البكتيريا . و يعود الفضل في اكتشافها إلى الطبيب ذو الأصل الدانماركي هانس كريستين جرام (Hans Christian Gram) الذي كان يعمل في مختبر التشريح التابع لمستشفى Berlin في العام 1880 للميلاد. حيث قام بطوير هذه الطريقة لتساعده على تفرقة أنواع البكتيريا المسببة لذات الرئة (Pneumonia)، حيث كانت أحد أنواع البكتيريا تصبغ بلون أحمر و أطلق عليها (بكتيريا سالبة جرام) و الأخرى باللون الأزرق (بكتيريا موجية جرام). و يعتمد لون البكتيريا في صبغة جرام على التركيب الكيميائي لجدار الخلية.

البكتيريات المختلفة تتفاعل بشكل متفاوت مع طريقة التلوين. لذلك تنقسم البكتيريات إلى:

    * غرام-موجبة: وتتلوّن إجمالًا باللون الأزرق الغامق

    * غرام-سالبة: تبقى عبر غرام دون تلوين - وإنّما تلوّن باللون الأحمر عبر الفوكسين

ينتج عن ذلك تشخيص مختلف حسب سماكة الجدار الخلويّ للبكتيربا المعيّنة وبالتالي أدوية مختلفة للعلاج. البكتيريات السالبة والموجبة تتجاوب إذًا بشكل مختلف مع المضادّات الحيويّة. بهذه الطريقة التي تستغرق القليل من الوقت (تقريبًا خمس دقائق) يستطيع المرء أن يحدّد التصرّف البكتيريّ حسب غرام وبالتالي أن يحدّد طريقة البدء مباشرة بعلاج غالبًا ما يكون منقذًا لحياة المريض حتّى قبل التحديد النهائيّ لنوع البكتيريا والذي يستغرق العديد من الأيّام.


 الطريقة

الطريقة تتألّف من ثلاث خطوات هي:

    * التلوين- إزالة التلوين- ثمّ التلوين المعاكس

1- في المرحلة الأولى يتمّ التلوين ببنفسجيّ غنتيان (أو المعروف بـ Methyl violet) المضاف إلى الفينول Phenol (المعروف تاريخيّا بالكاربول Carbol). البكتيريا الموجبة والسالبة حسب غرام تتلوّنان إذ ذاك .ثم تعالج البكتيريات بمحلول لوغول Lugol وتتكوّن حينها مركّبات من موادّ التلوين.

2- في الخطوة الثانية -وهي المهمّة- يختلف تفاعل البكتيريات، فبعد العلاج بالكحول -إيتانول (96%)- تفقد البكتيريا السالبة لونها المكتسب بدايةً بينما لا تتخلّى الموجبة عن لونها الأزرق الغامق الذي اكتسبته.

ويعود هذا الاختلاف إلى بناء الجدار الخلويّ لديهما فالبكتيريا السالبة تملك طبقة هزيلة من الموريين Murein لكن فوقها طبقة فوسفوليبيد Phospholipid.

بينما يتوفّر لدى الموجبة غلاف سميك من الموريين متعدّد الطبقات التي بينها يتجمّع محلول لوغول. وهنا يكون تأثير الإيتانول مجفّفًا حيث تبقى تجمّعات الألوان متوفّرةً في الجدار الخلوي.

هذه المرحلة -أي العلاج بالكحول- تتوجّب بعض الخبرة لتحديد تشخيصٍ أكيدٍ.

3- الخطوة الثالثة تشمل تلوّن البكتيريات بمحلول ملطّف -أي قليل التركيز- من الفوكسين المزاد إلى الفينول. (وبذلك ينتج اللون الأحمر لدى البكتيريات السالبة حسب تلوين غرام).


كما توجد طرق أخرى لمعرفة تصرّف البكتيريا حسب غرام مثل اختبار KOH.

[بنت الرافدين]

جرام(gram stain) :
 طريقة لصباغة البكتيريا ورؤيتها تحت الميكروسكوب ومن خلالها بتقدر تقسم البكتيريا لنوعين حسب قابليتها لهذه الصبغة : جرام موجب وجرام سالب
وتقريبا كل انواع البكتيريا ممكن تعملها detection عن طريق هاي الصبغة الا انواع معينة منها..
صبغة جرام الها اربع خطوات كتير سهلين :
1- بتضيف صبغة crystal violet وهي الصبغة الاساسية (primary stain)
على شريحة عليها جزء من مستعمرة البكتيريا اللي تريد تحدد نوعها ..وبتترك الصبغة مدة دقيقة واحدة. بعد ذلك تغسل بمياه مقطرة لكي تزيل الزيادة من الصبغة .
2_ الخطوة التانية اضافة الايودين(mordant iodine)..وتتركه دقيقة وبعدين تغسلها مرة تانية .
3_ نضيف مادة بتزيل اللون (decolorizer)..وهي ال (ethyl alcohol) , ونتركها لمدة 10 الى 30 ثانية وبعدين نغسله مرة تانية بماء مقطر .
4_الخطوة الاخيرة نضيف ال safranine واللي هي ال counter stain وتتركها لمدة 30 ثانية وبعدين بتغسلها وبتترك الشريحة لتجف لوحدها .
وبعدين تفحصها تحت الميكروسكوب على power 100x .

[بنت الرافدين]

صبغة جرام Gram Stain:
ـ وهي تتلخص في استعمال صبغتين مختلفتين هما: البنفسج البلوري Crystal violet والصفرانين Safranin
ـ تأخذ بعض أنواع البكتيريا الصبغة البنفسجية فقط وتسمى موجبة لصبغة الغرام.
ـ تأخذ أنواع أخرى صبغة الصفرانين وتظهر حمراء أو زهرية وتسمى بكتيريا سالبة لصبغة الغرام وبذلك يمكن تمييز هذين النوعين من البكتيريا وتصنيفها – ويعتمد ذلك على تركيب الجدار الخلوي لكل نوع.

[بنت الرافدين]

الجرام: صبغة تقبلها بعض أنواع البكتيريا فتسمى موجبة الجرام وترفضها بعض الأنواع فتسمى سالبة الجرام.

[بنت الرافدين]

اعتقد هاي المعلومات كلش كافية مو ؟؟؟؟

طبعا نزلت الاجابة في اربع مشاركات كل مشاركة من مصدر

[ابو حذيفة]

انا لازم انزل اربع مرات شكرا
الف شكر
الفين شكرا
3000 شكرا
4000 شكرا

[بنت الرافدين]

'>
 لا شكر على واجب