السلام عليكم ورحمة الله : تحية طيبة
أختي توتا :
تحضير أفلام ( مسحات ) الدم :
1. تنظف الشرائح جيدا قبل استعمالها مباشرة.
2. توضع نقطة صغيرة من الدم علي بعد 1 – 2 سم من أحـــــد أطرافها في منتصف الشريحة.
3. تفرد نقطة الدم باستعمال شريحة أخري طرفها أملس ناعم ( ويفضل أن يقل عرضها عن الأولى )
يوضع هذه الشريحة فوق الشريحة الأولي بزاوية 45 ْ وتحرك إلى الوراء حتى تفرد نقطة الدم وتملأ خط التماس بين الشريحتين.
4. يفرد الفيلم ( المسحة ) بسرعة وبخفة إلى الأمام.
5. يترك الفيلم في الهواء ثم يصبغ بصبغة ليشمان.
مواصفات الفيلم الجديد :
1. متوسط السمك.
2. يملأ ثلثي الشريحة.
3. له راس وذيل.
4. الدم المفرود غير متقطع علي الشريحة.
طريقة صبغ الأفلام( المسحات) بصبغة ليشمان:
1. توضع الشريحة علي حامل حوض الصبغة.
2. توضع الصبغة وتترك لمدة 2 – 3 دقائق.
3. يضاف ماء مقطر ضعف كمية الصبغة ويتم مزج الماء بالصبغة.
4. تترك الصبغة المخففة لمدة 7 – 10 دقائق علي الشريحة.
5. تغسل الشريحة بالماء الجاري لمدة دقيقتين ويترك الفيلم ليجف وتنظف الجهة الأخرى من الشريحة لإزالة بقايا الصبغة.
طريقة فحص الأفلام :
تعد كريات الدم البيضاء باستخدام العدسة الزيتية في خط يقطع الفيلم بالعرض من الرأس
للذيل بعيدا عن الأطراف الجانبية حتى يتم عد 100 خلية بيضاء.
لتحقيق نتيجة اكثر دقة يعد 200 خلية بيضاء.
بعد عد الخلايا البيضاء عدا نوعيا نسبيا يحول هذا الرقم النسبي الي القيمة المطلقة ( الكاملة) Absolute value
Fixing Thin Smears
After drying, only thin smears are fixed. Fixing is done using methanol in one of two ways:
Dip thin smear into methanol for 5 seconds.
Dab thin smear with methanol-soaked cotton ball.
Do not fix the thick smear. Even exposure of the thick smear to methanol fumes will prevent hemolysis and make it unreadable. If using the one slide method, prevent exposure of the thick smear to methanol or methanol fumes by carefully dipping or dabbing the slide, and gently blowing the fumes away from the thick smear area.
Staining Slides
Giemsa stain is available in the military supply system, and this staining method is presented. Preparation of Giemsa staining solution is done with buffered water and Giemsa concentrate. Do not shake the Giemsa concentrate as this will cause suspension of particulate matter in the stain resulting in artifacts on final slides. Formation of artifacts renders slides difficult to interpret.
Preparation of Giemsa staining solution
Prepare buffered water solution, pH 7.2:
Mix capful of buffering salts into 1000 ml of distilled water.
Check pH. Titrate with sodium hydroxide (NaOH) solution until pH is 7.2.
Appendix Figure 3-1. Thick and Thin Blood Smear Preparation.
Prepare Giemsa staining solution by mixing:
1 part unshaken Giemsa stain concentrate.
9 parts buffered water.
Slide Staining with prepared Giemsa solution
Place slides flat in a staining rack or other suitable surface.
Cover with 1-2 ml of Giemsa solution.
Let stand for 10 minutes.
Gently rinse by “floating” excess stain off slide with buffered water; be careful not to wash the blood smear away.
Rinse until no more stain is seen in solution.
Dry smear side down, making sure that smear does not touch the slide rack or other surface used for drying.
مع تمنياتي بالتوفيق ........
